INTRODUÇÃO: A ocorrência de apoptose e a expressão de marcadores proliferativos são ferramentas poderosas no estabelecimento do prognóstico do câncer.OBJETIVO: Avaliar a fração de crescimento de papilomas e carcinomas laríngeos de células escamosas, com três graus de diferenciação, através da apoptose e expressão de regiões organizadoras de nucléolo.MÉTODO: Estudo retrospectivo, cujo material em blocado em parafina foi submetido à microtomia e coloração em hematoxilina-eosina, e pela prata. As lâminas coradas foram utilizadas para quantificar o índice apoptótico e o número de regiões organizadoras de nucléolo (NORs) através da morfometria.RESULTADOS: A apoptose foi significativamente mais frequente em carcinomas bem diferenciados e em papilomas; enquanto que uma maior fração de crescimento, de NORs expressos e de células que expressaram maior número de NORs, foram mais frequentes nos carcinomas indiferenciados.CONCLUSÕES:Foi possível verificar que o índice apoptótico elevado indica menores chances de diferenciação tumoral nos carcinomas, enquanto que um maior número de NORs totais e células expressando NORs acima da média, e uma maior fração de crescimento, determinam maiores chances de proliferação celular anormal e maior diferenciação tumoral.

INTRODUCTION: Occurrence of apoptosis and expression of proliferative markers are powerful tools to establish a prognosis in the follow-up of cancer.OBJECTIVE: To evaluate the growth fraction in papillomas and laryngeal squamous cell carcinomas with three degrees of differentiation through apoptosis and the expression of nucleolus organizer regions.METHODS: Retrospective study from which paraffin material was submitted to microtomy and hematoxylin-eosin and silver staining. Stained slides were used to quantify the apoptotic index and the number of nucleolus organizer regions by morphometry.RESULTS: Apoptosis was significantly more frequent in well differentiated carcinomas and in papillomas, and a higher growth fraction of expressed nucleolus organizer regions and cells that expressed a greater than average number of nucleolus organizer regions were more frequently noted in undifferentiated carcinomas.CONCLUSIONS: Thus, it was possible to verify that a high apoptotic index was associated with a lower chance of tumor differentiation in carcinomas, while a greater number of total nucleolus organizer regions, cells expressing nucleolus organizer regions above average and a higher growth fraction were associated with greater likelihood of abnormal cell proliferation and increased tumor differentiation.

A Erliquiose canina é uma zoonose causada pela Ehrlichia canis, bactéria Gram negativa de distribuição mundial. Alguns cães com erliquiose se tornam portadores assintomáticos enquanto outros desenvolvem uma doença aguda com morte rápida. A apoptose pode ser importante na eliminação de patógenos intracelulares, podendo, nas infecções por Ehrlichia sp. e Anaplasma sp., ocorrer modulação da apoptose celular para prolongar a sobrevivência desses organismos. Para avaliação do papel da apoptose na erliquiose canina, sete cães foram distribuídos em dois grupos. No Grupo inoculado, realizou-se a infecção por via intravenosa com sangue infectado com E. canis (isolado Jaboticabal), sendo realizada a inoculação com PBS estéril nos animais pertencentes ao Grupo Controle. Semanalmente e até 35 dias pós-inoculação, amostras de sangue foram coletadas e submetidas a n-PCR e reação de imunofluorescência (RIFI) para confirmação da infecção. No 36° dia pós-inoculação, os animais foram eutanasiados, sendo as amostras de baço, linfonodo, rim e fígado coletadas e processadas para as técnicas de TUNEL e imunohistoquímica (Bcl-2, Bax). Verificou-se pela n-PCR que os animais inoculados se tornaram positivos para E. canis a partir da segunda semana. Pela RIFI, verificou-se animais com sorologia positiva a partir da terceira semana pós-inoculação. No grupo controle, todos os testes realizados foram negativos para E. canis. Apesar da reação de TUNEL mostrar maior incidência de apoptose no Grupo Inoculado, sendo o baço e os linfonodos os órgãos que apresentaram maior marcação, os resultados da imunohistoquímica para Bcl-2 e Bax indicam que a via intrínseca de apoptose não é importante nos órgãos analisados.

Some dogs infected with Ehrlichia canis become asymptomatic while others develop an acute illness followed by quick death. Apoptosis may be an important mechanism for elimination of intracellular pathogens. Also, Ehrlichia sp. and Anaplasma sp. can modulate apoptosis to extend their survival. To evaluate the role of apoptosis in canine ehrlichiosis, 7 dogs were assigned into 2 groups, one with 4 animals inoculated intravenously with blood infected with Ehrlichia canis (Jaboticabal isolate) and a control with 3 dogs, inoculated with sterile PBS. Blood samples were collected weekly and 35 days post-inoculation to confirm the infection by nPCR and immunofluorescence. Thirty-six days after inoculation the animals were euthanized and samples from spleen, lymph nodes, kidney and liver were collected to carry out the TUNEL technique and immunohistochemistry (Bcl-2, Bax). Inoculated animals became positive for E. canis by nPCR already in the second week and by immunofluorescence in the third week after inoculation. The control group showed negative for E. canis in all tests. The TUNEL reaction showed a higher incidence of apoptosis in the inoculated group, with stronger labeling in the spleen and lymph nodes. The results of immunohistochemistry for Bcl-2 and Bax suggest that the intrinsic pathway of apoptosis is not important in the analyzed organs.

A etiopatogênese da polipose nasal eosinofílica ainda não foi esclarecida. Os eosinófilos constituem as principais células do infiltrado inflamatório e estão relacionados com a perpetuação do processo inflamatório na rinossinusite crônica com pólipos nasais. OBJETIVO: Avaliar a ação in vitro da mitomicina no índice apoptótico de pólipos nasais eosinofílicos. MATERIAL E MÉTODO: Estudo prospectivo experimental autopareado com amostra de biópsia de 15 pacientes com polipose nasal eosinofílica. Cada fragmento foi dividido em dois grupos. No grupo experimental aplicou-se mitomicina por cinco minutos, na dosagem de 400 µg/ml. O grupo controle foi submetido às mesmas manipulações, mas utilizando-se somente meio de cultura. Os fragmentos contidos nos dois primeiros compartimentos, controle e experimento, foram imediatamente submetidas ao preparo para histopatologia. O outro par de amostra, contendo controle e experimento, foi incubado por 12 horas. Após 12 horas, os fragmentos foram retirados para exame histopatológico. O índice apoptótico foi determinado pela morfometria na coloração hematoxilina-eosina e pela análise da fragmentação do DNA. RESULTADO: A comparação do dois grupos demonstrou diferença significativa (p < 0,001) no índice apoptótico das culturas incubadas por 12 horas. CONCLUSÃO: A mitomicina induz in vitro o aumento do índice apoptótico dos eosinófilos dos pólipos nasais eosinofílicos.

The etiopathogenesis of eosinophilic nasal polyps is yet to be explained. Eosinophils are key components in the inflammatory infiltrate and are related to the perpetuation of the inflammatory process in chronic rhinosinusitis with nasal polyps. OBJECTIVE: This paper aims to evaluate the in vitro action of mitomycin upon the apoptotic index of nasal polyps. MATERIALS AND METHODS: This is a self-paired prospective experimental study using biopsy fragments from 15 patients with eosinophilic nasal polyps. Biopsy fragments were divided into two groups. In the case group, the fragments were treated with 400 µg/ml of mitomycin for five minutes. The control group fragments were treated with culture medium. The pair of fragments contained in the two first compartments - control and case - were immediately sent to the histopathologist. The other pair of samples containing control and case fragments was incubated for 12 hours. The fragments were then taken to the histopathologist for testing. The apoptotic index was determined by the morphometry in hematoxylin and eosin staining and DNA fragmentation analysis (TUNEL reaction). RESULTS: The comparison between the two groups showed a statistically significant difference (p < 0,001) in the apoptotic index of the 12-hour incubated cultures. CONCLUSION: Mitomycin acts in vitro upon the eosinophilic nasal polyps inducing the rise of the eosinophilic apoptotic index.

INTRODUÇÃO: As displasias do colo uterino são precursoras do carcinoma de células escamosas. Mutações induzidas por carcinógenos correlacionam-se com alterações proliferativas. O acúmulo dessas mutações e o descontrole da homeostase genômica permitem mudanças na expressão de determinados genes e geram desequilíbrios na proliferação celular e na apoptose. Marcadores imuno-histoquímicos de proliferação celular, de apoptose e de sobrevivência celular em lesões intraepiteliais cervicais ainda necessitam de estudo morfométricos para definir seus papéis na evolução das displasias ao carcinoma invasivo. OBJETIVOS: Para melhor entender os processos de proliferação celular, apoptose e renovação epitelial nessas lesões, foram realizadas histomorfometria para mitose e apoptose e reações imuno-histoquímicas das proteínas Bax, Bcl-2 e Ki-67 (reatividade, localização e intensidade) em biópsias cervicais. MÉTODOS: As amostras foram divididas em quatro grupos: 1. cervicite (n = 20); 2. displasia leve (n = 20); 3. displasia moderada (n = 20); 4. displasia acentuada (n = 20). RESULTADOS: Foram verificadas intensa proliferação celular e apoptose nas lesões de alto grau e ampla, intensa e difusa imunomarcação para Ki-67 e Bax. Esses achados foram encontrados de maneira discreta ou nula nos grupos cervicite e displasia leve. A marcação para Bcl-2 foi mais intensa nas lesões de alto grau, tendo sido discreta nas demais. A ampla marcação imuno-histoquímica de Ki-67 e Bax é sugestiva de elevado grau de renovação celular, o qual também é sustentado pela histomorfometria. A expressão do Bcl-2 aumenta com a gravidade da displasia. CONCLUSÃO: Esses achados indicam que o processo pré-neoplásico é dinâmico, com apoptose e mitose ocorrendo concomitantemente.

INTRODUCTION: Cervical dysplasias are precursor to squamous cell carcinoma of the uterine cervix. Carcinogen induced mutations correlate with proliferative alterations. Accumulation of such mutations and unbalance of genomic homeostasis induce changes in certain genes as well as affect cell proliferation and apoptosis. Immunohistochemical markers of cellular proliferation, apoptosis and cell survival in cervical intraepithelial lesions still require morphometric studies in order to define their role in the development of dysplasias caused by invasive carcinoma. OBJECTIVES: In order to better understand the processes of cellular proliferation, apoptosis and epithelial turn over in such precursory lesions, histomorphometric evaluation for mitosis and apoptosis as well as immunohistochemical reactions for Bax, Bcl-2 and Ki-67 proteins (reactivity, localization and intensity) were carried out in cervical biopsies. METHODS: Samples were split into four groups: 1. cervicitis (n = 20); 2. light dysplasia (n = 20); 3. moderate dysplasia (n = 20); 4. severe dysplasia (n = 20). RESULTS: Intense proliferation and apoptosis were observed in lesions with high, extensive, intense, and diffuse Ki-67 and Bax immunolabeling. Proliferation and apoptosis were mild or null in groups 1 and 2. Bcl-2 immunolabeling was more intense in high degree lesions and mild in the other groups. Extensive Ki-67 and Bax immunolabeling suggests an increased cellular turn over, which was also corroborated by histomorphometry. The more severe the dysplasia is the higher Bcl-2 expression. CONCLUSION: These data indicate that the pre-neoplastic process is dynamic and is concomitant with apoptosis and mitosis.

OBJETIVO: Estudar o impacto da finasterida na espermatogênese do Mesocricetus auratus, adulto. MÉTODOS: Foram avaliados 20 hamsters adultos, com idades superiores a 1 ano, distribuídos em dois grupos: grupo controle com dez animais (n=10) e grupo experimental também com dez animais (n=10). No grupo experimental foi aplicado 7,14ng/mL (0,5mL) de finasterida por 100mg/Kg/peso, subcutâneo (SC), na região dorsal do animal, três vezes por semana por 90 dias, dose correspondente a 5mg da droga usada em homens adultos, para tratamento da hiperplasia benigna da próstata (HBP). No final de três meses, esses Hamsters foram mortos por hipovolemia, após serem anestesiados com cloridrato de quetamina, na dosagem de 200 mg/kg juntamente com diazepam, na dosagem de 2,5 mg/kg. Os testículos foram retirados em monobloco juntamente com todo o aparelho geniturinário, fixados em formalina a 10% e encaminhados à histotécnica para posterior análise histológica em microscópico óptico. Foram usadas para coloração das lâminas a hematoxilina e eosina (HE). RESULTADOS: Quando foram mortos, os Hamsters do grupo de controle pesaram em média 129,0g e desvio padrão (DP) de 18,8g. O grupo de experimento apresentou média de peso de 145,0g e DP de 15,25g. A idade dos animas de controle quando foram mortos apresentou média de 15,2 meses e DP de 1,13 meses. Os animais de experimento apresentaram média de idade de 17,16 meses e DP de 0,82. A diferença das médias de peso entre os dois grupos não teve significado estatístico (p=0,0514). Os animais (100%) do grupo controle não tiveram alterações tubulares e apresentaram todas as etapas da espermatogênese normais. Quatro animais (40%) do grupo de experimento apresentaram hipotrofia dos túbulos seminíferos, e seis (60%) desses animais apresentaram espermatogênese normal, mas diminuída em relação ao grupo controle. Do ponto de vista estatístico houve significância (p=0,043) entre o grupo de experimento e controle em relação às alterações testiculares. CONCLUSÃO: Os animais em uso de finasterida apresentaram atrofia tubulares significativas e diminuição da espermatogênese em comparação com o grupo-controle.

PURPOSE: To study the effect of finasteride on the spermatogenesis of adult Mesocricetus auratus. METHODS: Twenty adult hamsters were evaluated. The animals were one year-older, and were randomly divided in 2 different groups: control group with ten animals (n=10) and experimental group also with ten animals (n=10). The animals in the experimental group were shot 7.14 ng/mL (0.5mL) of finasteride by 100mg/Kg, subcutaneously in the dorsal region three times per week during 90 days. This dose correspondes to 5mg of the drug used in adult men for the treatment of benign prostatic hyperplasia (BPH). After three months, the animals were anesthetized through association of 200mg/kg ketamine chloridrate and 2.5 mg/kg of diazepan and were dead through hypovolemia.. The testis removed along with the whole genitourinary apparel were fixed with 10% formalin and submitted to histological analisys by optical microscopy. The hematoxilin-eosin (HE) method was used to stain the slides. RESULTS: The mean weight of animals in the control group before death was 129.0±18.8gr. The mean weight of animals in experimental group was 145.0±15.25gr. The mean age of animals in control group before death was 15.2±1.13 months. The mean age of animals in experimental group before death was 17.16±0.82 months. The mean difference in weight between both groups was not statistical significant (p=0.0514). The totality of animals in control group (100%) presented no tubular alterations and showed no disturbancy in the spermatogenesis stages. Four animals (40%) in the experimental group showed hypotrophy of the seminiferous tubules and six (60%) showed normal spermatogenesis, however reduced compared to control group. There was statiscally significant difference (p=0.043) between the control and experimental group related to testicular alterations. CONCLUSION: The animals that were administered finasteride showed significant tubules atrophy and spermatogenesis reduction compared to control group.

Calcium phosphates and bioactive glasses have been used in many biomedical applications for more than 30 years due basically to their bioactive behavior. However, ceramics are too brittle for applications that require high levels of toughness and easy processability. In this work, a biphasic calcium phosphate (BCP) and a bioactive glass composition (BG) were combined with polymers to produce composites with tailorable properties and processability. The BCP particles were synthesized by a precipitation technique. The BG particles were produced by sol-gel processing. The BCP particles were treated with a silane agent to improve the compatibility between particles and the polymer matrix. Dense samples were produced by hot pressing (200 °C) a mixture of 30 wt.% of particles in poly (methyl methacrylate). The samples produced were characterized by X-ray diffraction, infrared spectroscopy and scanning electron microscopy. Mechanical properties were evaluated by a three point bending test. Samples were also submitted to in vitro bioactivity test and in vivo toxicity test. Results showed that the production of the composites was successfully achieved, yielding materials with particles well dispersed within the matrices. Evaluation of the in vivo inflammatory response showed low activity levels for all composites although composites with silane treated BCP particles led to milder inflammatory responses than composites with non-treated particles.